將提取的總RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,合成cDNA并加接頭序列,然后將cDNA進(jìn)行環(huán)化處理,并上機(jī)測(cè)序。
Pacbio 測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程:
1)高質(zhì)量總RNA的制備;
2)SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit (Clontech) 反轉(zhuǎn)錄,將 RNA 反轉(zhuǎn)錄成 cDNA;
3)文庫(kù)構(gòu)建:SMRTbell? Template Prep Kit 1.0;
4)上機(jī)測(cè)序:Sequel? Sequencing Kit 2.0。
將提取的總RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,合成cDNA并加接頭序列,然后將cDNA進(jìn)行環(huán)化處理,并上機(jī)測(cè)序。
Pacbio 測(cè)序?qū)嶒?yàn)流程:
1)總RNA的制備;
2)SMARTer PCR cDNA Synthesis Kit (Clontech) 反轉(zhuǎn)錄,將 RNA 反轉(zhuǎn)錄成 cDNA;
3)文庫(kù)構(gòu)建:SMRTbell? Template Prep Kit 1.0;
4)上機(jī)測(cè)序:Sequel? Sequencing Kit 2.0。