Shotgun蛋白質質譜鑒定
蛋白質全譜分析也可稱為質譜shotgun分析,指的是組分分析,研究對象是完整的組織、體液或其提
取物,其目的在于鑒定出盡可能多的肽和蛋白質分子。
技術原理:
蛋白質膠條/混合溶液鑒定
利用LC-ESI-MS/MS蛋白鑒定技術對膠條樣本(即SDS-PAGE樣本)、IP、co-IP、Pull-down等純化溶液
等中等復雜樣本進行蛋白鑒定。
技術原理:
電噴霧(ESI)技術是將待測分子溶解在溶劑中通過 HPLC 分離,以液相方式通過毛細管達到噴霧口,在噴霧口高壓電場作用下形成帶電荷的微滴,隨著微滴中的揮發性溶劑蒸發,微滴表面的電荷體密度隨半徑減少而增加,達到某一臨界點時,樣品以離子化的方式從液滴表面蒸發,進入質量分析器。
蛋白質膠點鑒定
利用MALDI-TOF/TOF蛋白鑒定技術對考/銀染的2D或DIGE膠點樣本或者較純的蛋白樣本進行蛋白鑒定。
技術原理:
MALDI-TOF/TOF(基質輔助激光解析電離飛行時間質譜)儀器主要由兩部分組成:基質輔助激光解析電離離子源(MALDI)和飛行時間質量分析器(TOF)?;|輔助激光解析(MALDI)技術是將樣品均勻包埋在基質中,基質吸收激光提供的能量而蒸發,攜帶部分樣品分子進入氣相,并將一部分能量傳遞給樣品分子使其離子化。TOF 的原理是離子在電場作用下加速飛過飛行管道,根據到達檢測器的飛行時間不同而被檢測,即測定離子的質荷比(M/Z)與離子的飛行時間成正比,從而檢測離子。