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科研服務

甲基化(BSP、NGS-BSP)

甲基化BSP介紹:

DNA甲基化是較早發現的修飾途徑之一,真核生物中甲基化發生于胞嘧啶,即在DNA甲基化轉移酶(DNMTs)的作用下的CpG二核苷酸5’端的胞嘧啶轉變為5’-甲基胞嘧啶。大量研究表明,DNA甲基化能引起染色質結構、DNA構象、DNA穩定性及DNA與蛋白質相互作用方式的改變,從而控制基因表達。DNA甲基化通常抑制基因表達,去甲基化則誘導了基因重新活化和表達,這種DNA修飾方式在不改變基因序列的前提下實現對基因表達的調控。BSP(Bisulfite Sequencing PCR,BSP)克隆測序法,是目前甲基化檢測的通用方法。


甲基化BSP實驗原理:

用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA,未發生甲基化的胞嘧啶被轉化為尿嘧啶,而甲基化的胞嘧啶不變;隨后再CpG島兩端設計引物進行PCR,將目的產物純化后進行TA克隆,每個克隆挑取陽性克隆測序,最后將測得的序列與原始序列比對,統計甲基化位點及數量,并分析甲基化程度。

DNA甲基化實驗原理.jpg

基于重亞硫酸鹽轉化的甲基化分析原理


甲基化服務特點:

1、克服了MSP只能作定性研究,可做定量研究;

2、敏感性高,待測DNA5-甲基胞嘧啶分布不均衡也可檢測;

3、只要客戶提供基因名稱或序列,我們免費設計引物;

4、周期快:2周出結果。

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