采用LC-MS/MS方法檢測(cè)18個(gè)草菇子實(shí)體(0H、24H和L24H每組各6個(gè))的代謝物。基峰色譜圖(BPC)表明，在正負(fù)離子模式下，3組樣本差異明顯(圖2A和B)，說(shuō)明L345-0044處理影響了草菇在CS脅迫下的代謝過(guò)程。根據(jù)p值≤0.05，VIP≥1的標(biāo)準(zhǔn)篩選差異代謝物，在正離子模式下0H_vs_24H中有3106個(gè)代謝物上調(diào)，2134個(gè)代謝物下調(diào)。在0H_vs_L24H中有586個(gè)代謝物上調(diào)，1949個(gè)代謝物下調(diào)(圖2C)。負(fù)離子模型也有類(lèi)似的結(jié)果(圖2D)。QC分析表明儀器穩(wěn)定性良好，數(shù)據(jù)可靠。OPLS-DA分析顯示組間可以明顯分開(kāi)，進(jìn)一步證實(shí)L345-0044在CS處理下影響了草菇的代謝過(guò)程(圖2E)。
利用MetPA數(shù)據(jù)庫(kù)對(duì)0H_vs_24H中上調(diào)的代謝物進(jìn)行通路富集分析，篩選出5條顯著富集通路(Impact >1)，包括亞油酸代謝和精氨酸生物合成。通過(guò)對(duì)0H_vs_24H中下調(diào)的差異代謝物進(jìn)行通路分析，篩選出7條顯著富集通路，如酮體的合成降解、苯丙氨酸、酪氨酸、色氨酸生物合成、果糖和甘露糖代謝。通過(guò)對(duì)0H_vs_L24H中下調(diào)的差異代謝物進(jìn)行通路分析，篩選出4條顯著富集通路，如酮體的合成和降解和谷胱甘肽代謝。
Heatmap分析顯示，L345-0044處理后L-酪氨酸、左旋多巴、纖維二糖、D-葡萄糖1-磷酸、乙酰乙酸和酪胺化合物的表達(dá)顯著上調(diào)(P< 0.05)(圖3A)。通過(guò)對(duì)24H_vs_L24H中上調(diào)的差異代謝物進(jìn)行富集分析，篩選出6條顯著富集的通路，如酮體的合成和降解、淀粉和蔗糖代謝、丁酸代謝(圖3B)。對(duì)24H_vs_L24H中下調(diào)的差異代謝物進(jìn)行富集分析，篩選出5條顯著富集的通路，如亞油酸代謝和苯丙氨酸代謝(圖3C)。
以上結(jié)果表明L345-0044處理顯著影響了酪氨酸代謝、淀粉和蔗糖代謝通路，并提高了參與這些通路的L-酪氨酸、左旋多巴、纖維二糖、D-葡萄糖1-磷酸和酪胺的含量。
