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多組學整合2連發,腸道研究新突破:人參殘渣有大用

2021-10-25

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 期刊:《Food Chemistry》

影響因子:7.514

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 期刊:《Journal of Functional Foods》

影響因子:4.451

最近,派森諾與中國農業科學院特產研究所合作,在《Food Chemistry》和《Journal of Functional Foods》相繼發表論文,通過高通量測序、代謝組檢測結合生理實驗分析,對喂食人參水溶性膳食纖維(SDF)后的實驗大鼠狀態進行記錄,并檢測其腸道菌群與代謝物以及各種生理指標,從微生物組、代謝物和生理指標三大角度研究了SDF對機體的作用。

一、研究背景

人參作為典型的食藥兩用植物,其生理活性的發現和確證一直是科研工作者的研究重點。人參膳食纖維(DF)是一種不能被人體消化的碳水化合物,被稱為人體的“第七大營養素”。其中,水溶性膳食纖維(SDF)和非水溶性膳食纖維(IDF)含量比例在1:5左右。研究發現,乳桿菌等益生菌可在以人參SDF為主要碳源的MRS培養基中增殖,這表明,人參SDF可能具有益生元特性。但遺憾的是,占據人參根生物量80%的DF,在實際生產中除了較少用作動物飼料以外通常被當作廢棄物而舍棄,造成了資源浪費和環境污染,關于人參SDF的代謝調節和腸道健康作用的報道也很少。

本研究通過動物實驗與高通量測序技術,結合派森諾基因云QIIME2分析,對人參DF的潛在健康價值進行了研究,以期為人參DF的開發利用奠定重要理論基礎。


二、研究內容與目的

本研究采用人參水溶性膳食纖維(SDF)對大鼠進行短期飲食干預(15天),對大鼠采食量、血糖、血脂、胰島素水平、免疫球蛋白、抗氧化狀態等指標進行檢測記錄,同時采集糞便和盲腸內容物樣本,對腸道菌群結構和短鏈脂肪酸進行檢測,以探究人參SDF對生物體的作用。


三、材料與方法

測序技術:Illumina NovaSeq高通量測序平臺

測序模式:微生物組16S rRNA基因V3-V4區

實驗對象:糞便與腸道內容物菌群

本研究的微生物組分析通過派森諾基因云QIIME2進行。


四、實驗設計

采用不同濃度的SDF對大鼠進行15天飲食干預,同時設空白對照組和低聚果糖陽性對照組,記錄大鼠各種生理指標,對結腸組織進行組織學觀察,并收集糞便和盲腸內容物樣本,進行微生物組多樣性組成譜測序與代謝物檢測。

表1 實驗處理情況

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五、結果與討論

1. 人參SDF對大鼠采食量、盲腸代謝物、血糖血脂水平、抗氧化狀態和免疫的影響

人參SDF能提高大鼠的采食量,還對血糖和血脂水平,尤其是甘油三酯有積極影響,能進一步改善健康大鼠的糖脂代謝。同時顯著改善血清抗氧化狀態和免疫球蛋白水平,增加盲腸SCFA(尤其是丁酸)濃度。

人參SDF對大鼠血糖血脂的影響

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人參SDF干預后,大鼠抗氧化狀態相關指標的變化

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人參SDF干預后,大鼠生長因子與免疫蛋白的變化

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人參SDF對大鼠盲腸短鏈脂肪酸(SCFA)含量的影響


2. 人參SDF對大鼠糞便質量、糞便代謝物和結腸形態的影響

對不同處理組大鼠的糞便質量和結腸形態分析發現,人參SDF增強了腸道結構,如絨毛和隱窩,并增加了糞便SCFA(尤其是乙酸和丁酸)的濃度。

人參SDF對大鼠糞便質量和結腸形態的影響

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人參SDF對大鼠結腸形態的影響

【正常組 (a)、SDFL200 (b)、SDFM400 (c)和SDFH800 (d)的結腸組織H&E染色圖像】

人參SDF對大鼠糞便中短鏈脂肪酸的影響

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3. 人參SDF對大鼠糞便和盲腸內容物中腸道菌群構成的影響

糞便菌群中,人參SDF強烈影響了厚壁菌門和擬桿菌門的豐度,并顯著促進益生菌和纖維素分解細菌(如乳酸桿菌、雙歧桿菌和布氏瘤胃球菌)的增殖。

盲腸菌群中,隨著人參SDF處理劑量的增加,大鼠盲腸內容物中的菌群逐漸發生改變,高劑量SDF處理組的腸道菌群與對照組大鼠腸道菌群具有顯著差異。乳酸桿菌、瘤胃球菌、梭狀芽孢桿菌、梭菌和糞球菌的豐度顯著增加,而顫螺菌屬和脫硫弧菌的豐度顯著降低。

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糞便樣本中的微生物群落多樣性與組成譜分析

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盲腸內容物樣本中的微生物群落多樣性與組成譜分析


4.  人參SDF的益生元性質

PICRUSt2功能預測結果顯示,SDF干預組的脂質代謝和外源生物降解與代謝的豐度有所增加。同時,和糞便菌群類似,盲腸菌群中益生菌(如乳酸桿菌、雙歧桿菌和糞球菌)和纖維素分解菌(如梭狀芽孢桿菌和瘤胃球菌)的富集也得到了SDF的促進。

RDA分析顯示,SDFH組的乳酸桿菌、梭菌和瘤胃球菌與乙酸、丁酸、增重、采食量和各種免疫因子與抗氧化指標呈正相關,但與丙酸、戊酸和丙二醛濃度呈負相關。SDFH組中顫螺菌的減少與丙酸、戊酸和MDA的低水平呈正相關。

這表明,人參SDF具有益生元性質,在抗氧化狀態、提高免疫力和促進盲腸健康方面發揮有益作用。

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糞便菌群的組成變化與功能預測分析結果

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盲腸內容物菌群的組成變化和RDA分析結果

此外,糞便微生物與糖脂代謝指標的相關性分析顯示,人參SDF可能通過調節腸道菌群來改善糖脂代謝(尤其是TG)水平。

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腸道微生物與糖脂代謝指標的相關性分析


六、總結

本研究采用人參水溶性膳食纖維(SDF)對大鼠進行短期飲食干預(15天),檢測記錄了大鼠采食量、血糖、血脂、胰島素水平、免疫球蛋白、抗氧化狀態等指標,同時檢測對腸道菌群和短鏈脂肪酸進行檢測分析,并得出以下結論:

人參SDF能顯著改善大鼠的生長性能、糖脂代謝和血清抗氧化狀態;

人參SDF能降低相關炎癥因子質量濃度,提高胰島素樣生長因子和免疫球蛋白水平;

人參SDF改善了腸道結構,提高糞便短鏈脂肪酸濃度(尤其是乙酸和丁酸),增加了糞便和盲腸內容物菌群中的厚壁菌門豐度,并促進了益生菌(如乳酸桿菌和雙歧桿菌)和纖維素分解菌(如瘤胃球菌和梭狀芽孢桿菌)的增殖;

以上結果表明:人參SDF可能通過促進特定益生菌的增殖和代謝來改善腸道環境,最終對大鼠的代謝和能量穩態產生積極影響。


本研究的測序工作由上海派森諾生物科技有限公司完成,微生物組分析工作主要由派森諾基因云QIIME2完成。

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