表1 長(zhǎng)期施用無(wú)機(jī)和有機(jī)肥后土壤物理化學(xué)性質(zhì)
nifH基因拷貝數(shù)在對(duì)照組最高（9.92 × 105 copies g?1），NL和NPM處理對(duì)nifH基因拷貝數(shù)有最大的抑制作用。然而，與N處理相比，植物殘?bào)w的應(yīng)用對(duì)nifH基因豐度沒(méi)有影響。nifH基因的豐度和DON，NO3?-N與DCo呈正相關(guān)，和pH，DOC和AP呈負(fù)相關(guān)。
對(duì)照組固氮菌多樣性（Shannon和Simpson）和OTU豐度（Chao1和Observed species）低于NL和NPM處理組。然而，與N處理組相比，植物殘?bào)w對(duì)固氮菌多樣性和OTU豐度沒(méi)有影響。多元回歸分析表明，固氮菌多樣性和豐度主要受土壤pH所影響，土壤pH占變異的32%以上。進(jìn)一步的相關(guān)分析顯示固氮菌多樣性和豐度的所有指標(biāo)與土壤pH呈負(fù)相關(guān)（P<0.01）。
圖2 多元回歸分析固氮菌群和土壤理化特性Alpha多樣性
過(guò)濾后得到996,682條高質(zhì)量序列，每個(gè)樣品序列為38,920至63,662不等，每個(gè)處理組獲得了79至189個(gè)OTU。NL的固氮菌群與較高的土壤pH相關(guān)，而NPM處理的固氮菌群與SOC，DOC，AP和TN相關(guān)。對(duì)實(shí)驗(yàn)地塊的446個(gè)OTU的MRT分析顯示，群落組成主要受土壤pH影響。
所有處理中，OTU被劃分到不同的屬，其中最豐富的屬相對(duì)豐度大于1%。Azospirillum，Bradyrhizobium和Azohydromonas是處理中三種最優(yōu)勢(shì)的屬，總豐度占了nifH基因序列的77.8%-97.4%。這些屬的豐度在不同組中有所差異。
大多數(shù)OTU在N，NPS，NRS和NR處理之間共有，并且PERMANOVA分析證實(shí)在這些處理之間固氮菌群沒(méi)有差異。OTU355是對(duì)照組中豐度最高的指示物種，相對(duì)豐度為2.89%，與Bradyrhizobium密切相關(guān)，與土壤pH，SOC，DOC，AP和AK呈負(fù)相關(guān)，與NO3?-N和DCo呈正相關(guān)。NL組中豐度最高的指示屬是OTU97，相對(duì)豐度為2.88%，與Azohydromonas緊密相關(guān)，與土壤pH呈正相關(guān)，與NO3?-N（P < 0.01）呈負(fù)相關(guān)。NPM中指示物種是OTU88，與Frankia密切相關(guān)，豐度為1.57%，與DOC和AP呈正相關(guān)，與DCo（P < 0.05）呈負(fù)相關(guān)。
圖3 處理間固氮菌群結(jié)構(gòu)的CCA分析
圖4 優(yōu)勢(shì)固氮屬和處理間的響應(yīng)
圖5 對(duì)照組、NL和NPM處理組中的指示物種
