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炙手可熱的宏基因組測序技術(mNGS)

2021-07-23

2019年末,COVID-19的大爆發,不僅讓全世界的人民了解到了核酸檢測,更看到了宏基因組測序技術(metagenomics next-generation sequencing, mNGS)在新發或者少見病原微生物的檢測與鑒定方面的潛力。今天,小編就和大家一起走進mNGS,了解mNGS是憑借哪些優勢走上資本的風口。



特點一:高效、快速

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復旦大學附屬華山醫院感染科主任張文宏曾在“感染分子診斷高峰論壇2020”上做了這樣一個對比,2003年的SARS的鑒定耗時5個多月,2013年的H7N9的鑒定耗時1個多月,而此次借助宏基因組測序,僅在數天內,快速鑒定并分析出新冠病毒的基因組,在2020年1月11日中國團隊率先公布了新冠病毒基因組序列。從“5個月+”到“數天”的鑒定時間的縮短,是這場戰役中的中國速度,更是mNGS高效、快速的映射。


特點二:避免試錯,數萬種病原體一網打盡

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分離培養與生化鑒定是臨床公認的病原體檢測的標準診斷方法。傳統的病原微生物的檢測方法雖然多,并且可以組合應用,對于常見高發感染也非常有效,但他們都屬于試錯型,高度依賴于臨床醫生的判斷選擇。但是mNGS的出現,為病原體的檢測開辟了一個新的方向。 mNGS通過直接檢測臨床標本中病原核酸,幫助明確標本中微生物的種類和相對數量,無需對病原菌進行培養即能夠幫助確定引起感染的病原,實現了一次檢測,一網打盡的目的,已成為輔助臨床確定重癥感染性疾病重要的檢測手段。

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特點三:深度挖掘預測耐藥性

一提到超級細菌(superbug),我想每個人都心頭一顫。由于對抗生素的濫用,處于平衡狀態的抗菌藥物和細菌耐藥之間的矛盾被破壞,具有耐藥能力的細菌也通過不斷地基因突變和進化,獲得更強的耐藥能力,因此也出現和傳播了更多的抗生素抗性基因(Antibiotic resisitance genes, ARGs),隨之也出現了更多重耐藥菌,甚至是廣泛耐藥菌,比如多重耐藥性結核桿菌(MDR-TB)。

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常用的ARGs檢測方法主要包括傳統微生物培養法和分子生物學方法。傳統微生物培養法主要是評估微生物對抗生素的敏感或耐藥程度(藥敏實驗)。分子生物學方法主要是PCR,qPCR,DNA微陣列和宏基因組測序。2021年2月發表在“中華檢驗醫學雜志”的《宏基因組高通量測序技術應用于感染性疾病病原檢測中國專家共識》中建議

(1)對于生長緩慢或藥敏試驗復雜耗時,并且耐藥基因型和表型有良好相關性的病原菌,可對純菌落進行全基因組測序,推測耐藥情況。

(2)可采用讀長較長的三代測序(nanopore測序),耐藥基因與微生物之間匹配,也可間接推測其耐藥情況。


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