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【干貨】轉錄組韋恩圖“食用”指南

2021-03-17


韋恩圖,又稱為venn圖,是我們在日常數據處理過程中經常用到的一種圖。圖雖小,但實用性卻非常高!

做轉錄組項目,重要的就是看每個基因的表達量,根據表達量差異找出差異基因,從而研究差異基因的功能。而在作圖之前重要的就是按照特定條件找出差異基因,此方面我們分為三類來介紹如何按需篩選差異基因:

1.共有差異基因;

2.共有上調基因或共有下調基因;

3.一組上調,另一組下調基因。

在轉錄組項目提供的結果中,有一個差異基因匯總的表格名為diff_gene_of_all_groups,它就是我們今天數據來源的主角了,一般安安靜靜的躺在這里:

圖片1.png


我們通篇軟文干貨的講解都以此數據為基礎,我們假設有四個分組:A、B、C、D

六個比較組:A_vs_B、A_vs_C、A_vs_D、B_vs_C、B_vs_D、C_vs_D

在Excel表格中有一個多條件篩選功能,這個功能對于提高效率有著質的飛躍:

1. 共有差異基因

在diff_gene_of_all_groups表格中,上調的基因標為up,下調標為down,--為非顯著差異基因。假如我們想查找在A_vs_B、A_vs_C中的共有差異基因,只需要按以下操作:

圖片2.png


①點擊篩選

②選擇A_vs_B組

③選擇up和down(上調和下調)

④A_vs_C組進行同樣操作

此時第一列篩選出的所有基因即為A_vs_B和A_vs_C兩組共有的差異基因,下圖:

圖片3.png

同理如果想篩選出三組或更多組的共有差異基因都可按此來操作。


2. 共有上調基因或共有下調基因

有了上面的鋪墊,我們接下來的講解就變得容易了很多,共有上調(下調)基因只需在1的基礎上,把③和④(選擇up和down)改為選擇up(或down)即可。

圖片4.png


3. 一組上調,另一組下調

前面操作一致,只需要在上述操作中把③和④分別改為A_vs_B選擇up且A_vs_C選擇down。

圖片5.png

同理如果想要獲取多個組不同類型(上下調)的共有差異基因,可以根據需求在比較組中自由選擇。

講到這里,我們作圖數據就算是整理好了,接下來開始講解本文的主體部分,韋恩圖的制作。韋恩圖的制作網站和方法千千萬萬,我們這里選取典型的三種來為大家講解。


一、云分析

如果您的項目是我們的真核有參轉錄組云平臺項目,那么韋恩圖的制作對您來說就要相對簡單一些,因為我們的云平臺會自動的將您的比較組進行整理羅列,您只需按照下圖方式進行選擇,即可自由選擇比較組制作韋恩圖。

圖片6.png

除此之外,還提供了一些簡單的圖表調整:

圖片7.png

當然您也可以在分析設置界面,自由調整分組方案以及比較方案:

圖片8.png



二、派森諾基因云的“云圖匯”小工具

韋恩圖作圖網址:https://www.genescloud.cn/chart/VennPlot

在使用小工具之前要先注冊一個賬號,注冊完成后就可以使用所有小工具了(免費哦~),除了韋恩圖之外還有很多其他實用小工具供選擇,感興趣的老師可以去網站看一看。

還是以上文原始數據為例,如何制作A_vs_B、A_vs_C、A_vs_D三個比較組上調基因的韋恩圖呢?

首先,將每個比較組中的上調基因篩選出來:

圖片9.png

參照上文Excel篩選功能,將A_vs_B組篩選處選為up,第一列中的gene_id即為A_vs_B組所有的上調基因。將其單獨放到一個Excel表格,并標為A_vs_B列。

圖片10.png

同理篩選A_vs_C和A_vs_D比較組:

圖片11.png

圖片12.png

注意:細心的老師可能已經發現了,在篩選A_vs_C和A_vs_D比較組時,A_vs_B比較組的篩選條件已經從up調回了all(即--+up+down)。在選取一個比較組的上調基因時一定要確保不受其他組干擾!

將三組合并到同一個Excel之中:

圖片13.png

此時我們的作圖數據已整理完畢,但是我們的云圖匯小工具暫時只支持txt、tsv、csv三種格式,所以我們需要做一步格式轉換,右擊另存為文本文件或者CSV格式即可。

圖片14.png

最后按照圖示順序上傳數據即可:

圖片15.png

可點擊上圖4處下載高清PDF格式圖片。

另如果想知道上述交集處數字9代表的是哪些基因,應該怎么做呢?

當然簡單的方法即是點擊數字9即可在下方滾動區域顯示gene_id列表。

除了上述方法外我們還有另一種方法可以選擇:

只需要按照上述篩選功能在Excel表格中倒推即可。選擇在三個比較組中都上調的基因,下圖所示第一列即為在三個比較組中都上調的基因(正好是9個,還可驗證作圖是否正確):

圖片16.png

 同理也可推出其他交集數字所代表的基因是哪些,按照比較組上下調關系篩選即可。


三、韋恩圖在線繪制網址-jvenn

網址:http://jvenn.toulouse.inra.fr/app/example.html

圖片17.png

如上圖所示,該網站整體界面非常簡潔,可以直接將gene list粘貼到網站上無需上傳文件,且支持最多六個比較組的韋恩圖制作(上述兩種方式最多只能制作五個比較組的韋恩圖)。也可在右下方自由更改組名以及填充顏色。

該網站還支持直接導出CSV格式的表格,方便直接查看各個比較組的共有差異基因:

圖片18.png

以上就是今天給大家介紹的三種韋恩圖作圖方式了,是不是既簡單又實用呢~大家可以根據自己的喜好來進行選擇。

歡迎關注我們的公眾號,我們會持續不斷的更新簡單實用的干貨技巧,為您的科研征途獻上一份自己的力量!


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